Amidasi (AMD)
Enzimi:Sò catalizatori biologichi macromoleculari, a maiò parte di l'enzimi sò proteine
Amidasi:Catalizà l'idrolisi di diverse amidi alifatiche è aromatiche endogene è straniere trasferendu un gruppu acile à l'acqua cù a pruduzzione di acidi liberi è ammonia. L'acidi idrossamici è altri acidi organici sò largamente usati cum'è medicinali perchè sò custituenti di fattori di crescita, antibiotici è inibitori di tumori. L'amidasi ponu esse divise in acilasi di tipu R è di tipu S secondu a stereoselettività di u catalizzatore.
In più di catalizà l'idrolisi di l'ammidi, l'amidasi pò ancu catalizà reazzioni di trasferimentu acilicu in presenza di co-substrati cum'è l'idrossilammina.
L'amidasi cù diverse fonti anu diverse specificità di substratu, alcune di elle ponu idrolizà solu ammidi aromatiche, alcune di elle ponu idrolizà solu ammidi alifatiche, è alcune idrolizà α- o ω-amino ammidi. A maiò parte di l'amine anu una bona attività catalitica solu per l'ammidi aromatiche acicliche o semplici, ma per l'aromatici cumplessi, l'ammidi eterocicliche, in particulare l'ammidi cù sustituenti orto, sò generalmente à bassa attività (solu pochi enzimi mostranu migliori effetti catalitici).
Meccanismu cataliticu:
| Enzimi | Codice di u produttu | Codice di u produttu |
| Enzima in polvere | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | un inseme di 19 amidasi, 50 mg ciascuna 19 articuli * 50 mg / articulu, o altra quantità |
| Kit di screening (SynKit) | ES-AMD-1900 | un inseme di 19 amidasi, 1 mg ognuna 19 articuli * 1 mg / articulu |
★ Alta specificità di u substratu.
★ Forte selettività chirale.
★ Alta efficienza di cunversione.
★ Menu sottoprodotti.
★ Cundizioni di reazione lievi.
★ Rispettosu di l'ambiente.
➢ U screening enzimaticu deve esse realizatu per substrati specifici per via di a specificità di u substratu, è ottene un enzima chì catalizeghja u substratu di destinazione cù u megliu effettu cataliticu.
➢ Ùn cuntattate mai cundizioni estreme cum'è: alta temperatura, pH altu/bassu è solventi organici cù alta cuncentrazione.
➢ Nurmalmente, u sistema di reazione deve include un substratu, una soluzione tampone (u pH ottimale di reazione di l'enzima). I co-substrati cum'è l'idrossilamina devenu esse presenti in u sistema di reazione di trasferimentu acilicu.
➢ L'AMD deve esse aghjuntu per ultimu in u sistema di reazione cù u pH è a temperatura di reazione ottimali.
➢ Tutti i tipi d'AMD anu diverse cundizioni di reazione ottimali, dunque ognunu di elli deve esse studiatu più in dettagliu individualmente.
Esempiu 1(1):
Attività di idrolisi à diversi substrati di amide
| Substratu | Attività specifica μmol min-1mg-1 | Substratu | Attività specifica μmol min-1mg-1 |
| Acetamide | 3.8 | ο-OH benzamide | 1.4 |
| Propionamide | 3.9 | p-OH benzamide | 1.2 |
| Lattamide | 12.8 | ο-NH2benzamide | 1.0 |
| Butiramide | 11.9 | p-NH2benzamide | 0,8 |
| Isobutiramide | 26.2 | ο-Toluamide | 0.3 |
| Pentanamide | 22.0 | p-Toluamide | 8.1 |
| Esanamide | 6.4 | Nicotinamide | 1.7 |
| Cicloesanamide | 19,5 | Isonicotinamide | 1.8 |
| Acrilamide | 10.2 | Picolinamide | 2.1 |
| Metacrilamide | 3.5 | 3-Fenilpropionamide | 7.6 |
| Prolinamide | 3.4 | Indol-3-acetamide | 1.9 |
| Benzammide | 6.8 |
A reazione hè stata realizata in una soluzione tampone di fosfatu di sodiu 50 mM, pH 7,5, à 70 ℃.
| Amidi | Idrossilammina | Idrazina |
| Acetamide | 8.4 | 1.4 |
| Propionamide | 18.4 | 3.0 |
| Isobutiramide | 25.0 | 22.7 |
| Benzammide | 9.2 | 6.1 |
A reazione hè stata realizata in una soluzione tampone di fosfatu di sodiu 50 mM, pH 7,5, à 70 ℃.
Cuncentrazione di reagenti correlata: ammidi, 100 mM (benzamide, 10 mM); idrossilammina è idrazina, 400 mM; enzima 0,9 μM.
Esempiu 2(2):
Esempiu 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Estremofili, 2001, 5: 183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al. Biochimica di Prucessu, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al. Chimica Bioorganica, 2017, Disponibile in linea 7.
