Amidase (AMD)
Enzymes:Sò catalizzatori biologichi macromoleculari, a maiò parte di l'enzimi sò proteini
Amidase:Catalyse l'idrolisi di diverse amidi alifatiche è aromatiche endogene è stranieri trasferendu un gruppu acil à l'acqua cù a produzzione di acidi liberi è ammonia.L'acidi idrossamici è altri acidi organici sò largamente usati cum'è droghe perchè sò cumpunenti di fattori di crescita, antibiotici è inhibitori di tumore.L'amidasi ponu esse divisi in acilasi di tippu R è di tippu S secondu a stereoselectività di catalizzatore.
In più di catalizà l'idrolisi di l'amidi, l'amidasi pò ancu catalizà e reazzioni di trasferimentu di acili in presenza di co-substrati cum'è l'idrossilamina.
L'amidasi cù diverse fonti anu una spécificità di sustrato differente, alcuni di elli ponu idrolizza solu ammidi aromatiche, alcuni ponu idrolizza solu ammidi alifatici, è alcuni idrolizzanu α-o ω-amino ammidi.A maiò parte di l'amine anu una bona attività catalitica solu per l'amidi aromatici aciclici o simplici, ma per l'aromatichi cumplessi, l'amidi eterociclici, in particulare l'amidi cù sustituenti orto, sò generalmente bassi in attività (solu uni pochi enzimi exhibenu effetti catalitici megliu).
Meccanisimu cataliticu:
Enzymes | Codice di u produttu | Codice di u produttu |
Polvere di Enzyme | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | un set di 19 amidasi, 50 mg ognunu 19 articuli * 50mg / articulu, o altra quantità |
Kit di screening (SynKit) | ES-AMD-1900 | un set di 19 amidasi, 1 mg ogni 19 articuli * 1mg / item |
★ Alta specificità di sustrato.
★ Forte selettività chirale.
★ Alta efficienza di cunversione.
★ Meno sottoprodotti.
★ Cundizioni di reazione ligera.
★ Amichevule à l'ambiente.
➢ U screening enzimaticu deve esse realizatu per sustrati specifichi per via di a specificità di u sustrato, è uttene una enzima chì catalizza u sustrato di destinazione cù u megliu effettu cataliticu.
➢ Ùn mai cuntattate cù cundizioni estremi cum'è: alta temperatura, pH altu / bassu è solvente organicu cun alta concentrazione.
➢ Normalmente, u sistema di reazione deve include sustrato, soluzione tampone (U pH di reazione ottima di l'enzima).Co-substrati cum'è l'idrossilamina duveranu esse prisenza in u sistema di reazzione di trasferimentu di acil.
➢ AMD deve esse aghjuntu l'ultimu in u sistema di reazione cù u pH è a temperatura di reazione ottimali.
➢ Tutti i tipi di AMD anu diverse cundizioni di reazione ottimali, cusì ognunu deve esse studiatu individualmente.
Esempiu 1(1):
Attività di idrolisi su diversi substrati ammidi
Sustrattu | Attività specifica μmol min-1mg-1 | Sustrattu | Attività specifica μmol min-1mg-1 |
Acetamide | 3.8 | ο-OH benzamide | 1.4 |
Propionamide | 3.9 | p-OH benzamide | 1.2 |
Lactamide | 12.8 | ο-NH2benzamide | 1.0 |
Butiramide | 11.9 | p-NH2benzamide | 0,8 |
Isobutyramide | 26.2 | ο- Toluamide | 0.3 |
Pentanamide | 22.0 | p- Toluamide | 8.1 |
Hexanamide | 6.4 | Nicotinamide | 1.7 |
Ciclohexanamide | 19.5 | Isonicotinamide | 1.8 |
Acrilammide | 10.2 | Picolinamide | 2.1 |
Metacrilamide | 3.5 | 3-fenilpropionamide | 7.6 |
Prolinamide | 3.4 | Indol-3-acetamide | 1.9 |
Benzamide | 6.8 |
A reazione hè stata fatta in una soluzione tampone di sodium phosphate 50mM, pH 7,5, à 70 ℃.
Amides | Idrossilammina | Idrazina |
Acetamide | 8.4 | 1.4 |
Propionamide | 18.4 | 3.0 |
Isobutyramide | 25.0 | 22.7 |
Benzamide | 9.2 | 6.1 |
A reazione hè stata fatta in una soluzione tampone di sodium phosphate 50mM, pH 7,5, à 70 ℃.
Concentrazione di reagenti Related: amidi, 100 mM (benzamide, 10 mM);idrossilammina e idrazina, 400 mM;enzima 0,9 μM.
Esempiu 2(2):
Esempiu 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Estremofili, 2001, 5: 183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Process Biochemistry, 2015, 50 (8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Chimica Bioorganica, 2017, Disponibile in ligna 7.